点击次数:6548 发布日期:2017/04/11 来源:华斯泰
日期 | 时间 | 授课内容 |
6月9日 |
9:30-20:00
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培训报到 |
6月10日 |
9:00-11:30
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理论讲解: 1.CRISPR/Cas9靶向基因改造技术简介(三大基因组编辑工具) 2.CRISPR/Cas9系统作用原理 3.guide RNA序列设计(特异性分析,效率验证,不同物种sgRNA设计) |
实验操作: 1.CRISPR/Cas9基因表达载体构建 2.连接,转化 |
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13:00-17:00
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理论讲解: 1.基因转染技术(脂质体转染,电转,病毒转导,显微注射等) 2.Crispr/Cas9转染策略(植物,动物,原核生物) 3.CRISPR/Cas9病毒系统选择 |
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实验操作: 1.CRISPR/Cas9转染靶细胞 |
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6月11日
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9:30-20:00
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理论讲解: 1.基因敲除小鼠模型构建策略 2.Crispr/Cas9与siRNA、shRNA 3.阳性克隆筛选策略选择 |
实验操作: 1.CRISPR/Cas9转然后基因组DNA提取 2.靶基因修饰位点PCR扩增及鉴定(引物设计策略) |
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13:00-17:00
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理论讲解: 1.多靶点sgRNA载体构建策略 2.Crispr/Cas9系统应用实例分析 1.)哺乳动物 2).植物 3).细菌,真菌 |
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实验操作: 1.SDS-PAGE胶制备,琼脂糖凝胶电泳 2.T7E1法检测Crispr/Cas9系统sgRNA效率。 |