点击次数:2741 发布日期:2019/07/13 来源:华斯泰
日期 | 时间 | 授课内容 |
8月9日 |
10:00-18:00
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培训报到 |
8月10日 |
9:00-11:30
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理论讲解: 一、基因编辑技术简介 1.ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因编辑技术 1.guide RNA序列设计 2.靶基因序列查找 3.sgRNA在线设计、特异性分析和效率验证 4.不同物种sgRNA设计 |
实验操作: 一、CRISPR/Cas9基因表达载体克隆构建 1.sgRNA设计合成 2.敲除载体选择及线性化 3.sgRNA连接,转化等 |
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13:00-17:00
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理论讲解: 一、CRISPR/Cas9转染策略 1.生物转染 2.物理转染 3.化学转染 4.筛选策略选择 二、脂质体转染,电转,病毒转导,显微注射等) 三、Crispr/Cas9转染策略(植物,动物,原核生物) 四、CRISPR/Cas9病毒系统选择 |
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实验操作: CRISPR/Cas9敲除质粒转染靶细胞 |
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8月11日
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9:00-11:30
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理论讲解: 一、CRISPR技术应用解析 1.基因敲除2.基因敲入3.CRISPR在转录调控中的应用4.CRISPR靶基因标记定位5.基因敲除小鼠模型构建策略 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除小鼠模型构建2.植物基因敲除应用3.细菌,真菌等基因敲除应用 三、Cripr基因脱靶分析及解决方案 四、Crispr/Cas9与siRNA、shRNA |
实验操作: 1.CRISPR/Cas9转染后靶DNA检测 2.靶基因修饰位点扩增及鉴定 |
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13:00-17:00
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理论讲解: 一、单碱基基因编辑技术 1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统。 二、CRISPR-Cpf1系统介绍 三、CRISPR-C2c2系统介绍 四、多靶点sgRNA载体构建策略 五、Crispr/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析 |
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实验操作: 1.CRISPR基因敲除效果检测 |